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免疫沉淀實驗服務(wù)

簡要描述：免疫沉淀實驗服務(wù)是一種純化目的蛋白質(zhì)，及抗原或抗體定性檢測的常用方法。其基本原理基于“抗原-抗體"免疫反應(yīng)，在蛋白提取液中加入某抗原特異的抗體，形成“抗原-抗體"的免疫復(fù)合物后，再與和免疫球蛋白(抗體)有高親和性的Protein A/G beads孵育，純化免疫復(fù)合物。

更新時間：2026-03-20
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實驗技術(shù)服務(wù)

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一、定義

Immunoprecipitation，IP

用特異性抗體將細(xì)胞內(nèi)某個目標(biāo)蛋白從總蛋白中 “抓取" 并富集出來，用于后續(xù)檢測。

和 Co-IP 區(qū)別：
IP：富集單個目標(biāo)蛋白
Co-IP：富集蛋白復(fù)合物，檢測相互作用

二、主要用途

富集低豐度蛋白，方便 Western blot 檢測
檢測蛋白磷酸化、泛素化、乙酰化等修飾
純化蛋白用于質(zhì)譜、酶活實驗
驗證抗體特異性

三、實驗流程（標(biāo)準(zhǔn)）

細(xì)胞裂解
非變性 / 溫和變性裂解液，加蛋白酶 / 磷酸酶抑制劑
預(yù)清除
加 Protein A/G 磁珠，減少非特異結(jié)合
免疫沉淀
加目標(biāo)蛋白一抗，4℃ 孵育過夜
結(jié)合磁珠
加 Protein A/G 磁珠，4℃ 結(jié)合 2–4 h
洗滌
洗 3–4 次，去除雜蛋白
洗脫
上樣緩沖液煮沸，做 Western blot 或質(zhì)譜

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免疫沉淀實驗服務(wù)

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