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免疫共沉淀實驗步驟:
1.試劑準備,樣品收集
2.免疫沉淀反應后,在進行電泳
3.通過免疫共沉淀確定結合蛋白
免疫共沉淀:是一種利用抗原抗體相互作用的免疫學原理來研究蛋白質相互作用的經典實驗方法,它可以確定兩種蛋白在完整細
胞內生理條件下是否存在相互作用。
細胞用溫和非變性裂解液裂解,離心取上清
加入Protein A/G 磁珠預清除非特異性結合
加入目標蛋白一抗或 IgG 對照,4℃ 孵育過夜
加入 Protein A/G 磁珠,4℃ 結合 2–4 h
洗滌磁珠,去除雜蛋白
煮沸洗脫,進行 Western blot 檢測互作蛋白
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