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哮喘模型構建方法如下:
1. 明礬致敏佐劑制備:10%明礬溶液2ml與500ug/ml OVA2ml等量混合后,用NAOH調PH值為6.5,室溫孵育60min,750r/min,離心5min,去掉上清液,重溶于2ml PBS。致敏時每只小鼠腹腔注射200ul,其中含2mg明礬和100ug OVA。
2. 致敏:小鼠分別于第0、14天時腹腔注射明礬致敏佐劑0.2ml,對照組注射相同劑量的PBS溶液,正常飲食飼養。
3. 激發:霧化吸入,第21天時小鼠放入有機玻璃箱,5% OVA霧化吸入,每天30min,共7d,一次致敏后24h內檢測。
小鼠:BALB/c 小鼠(6–8 周,雌性更常用)
大鼠:SD / Wistar(較少用,機制研究多用小鼠)
OVA(卵清蛋白):致敏與激發抗原
氫氧hua鋁凝膠(Al (OH)?):佐劑,增強免疫反應
生理鹽水
混合液:
OVA 100 μg + Al (OH)? 2 mg / 只
用生理鹽水配至 0.2 mL / 只
腹腔注射,每 7 天一次,共 3 次
5% OVA 生理鹽水溶液
霧化吸入 30 min / 天,連續 3 天
對照組:同等流程,用生理鹽水替代 OVA
末次激發后 24–48 h 取材
此時氣道炎癥、黏液高分泌典型
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