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transwell轉(zhuǎn)移實驗服務(wù)

簡要描述：原理:常用8.0um，12.0um膜，上室種腫瘤細(xì)胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，腫瘤細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑，計數(shù)進入下室的細(xì)胞量可反映腫瘤細(xì)胞的遷移能力。

更新時間：2026-03-20
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實驗技術(shù)服務(wù)

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一、基本原理

Transwell 小室：上層 + 下層，中間有多孔濾膜（8 μm 常用）
遷移實驗（Migration）：細(xì)胞主動穿過膜孔，從上層到下層
侵襲實驗（Invasion）：膜上包被Matrigel，模擬細(xì)胞穿過基底膜
染色后計數(shù)穿膜細(xì)胞，反映轉(zhuǎn)移能力

二、核心材料

Transwell 小室（24 孔板，8 μm 孔徑）
Matrigel（僅侵襲實驗用）
無血清培養(yǎng)基
含血清培養(yǎng)基（下室趨化）
甲醇 / 多聚甲醛固定
結(jié)晶紫染色

三、實驗步驟（通用標(biāo)準(zhǔn)流程）

1. 鋪膠（僅侵襲實驗）

Matrigel 用無血清培養(yǎng)基1:8 稀釋
每孔上層加 50 μL
37℃ 孵育 2–4 h 或過夜 使其凝固

2. 細(xì)胞處理

胰mei消化，無血清培養(yǎng)基重懸
計數(shù)，調(diào)整濃度：1×10? 細(xì)胞 / 孔 左右

3. 加樣

上室：200 μL 細(xì)胞懸液（無血清）
下室：600 μL 含 10% FBS 培養(yǎng)基（趨化）

4. 培養(yǎng)

37℃ 培養(yǎng)

遷移：12–24 h
侵襲：24–48 h

5. 固定與染色

取出小室，PBS 輕洗
甲醇固定 15 min
0.1% 結(jié)晶紫染色 15–20 min
棉簽輕輕擦掉上室未穿膜細(xì)胞

6. 拍照計數(shù)

隨機取 5 個視野（×100 或 ×200）
ImageJ 計數(shù)細(xì)胞數(shù)，計算平均值

四、結(jié)果判斷

穿膜細(xì)胞越多 → 遷移 / 侵襲能力越強
給藥組 vs 模型組：細(xì)胞數(shù)顯著減少 → 抑制轉(zhuǎn)移

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transwell轉(zhuǎn)移實驗服務(wù)

一、基本原理

二、核心材料

三、實驗步驟（通用標(biāo)準(zhǔn)流程）

1. 鋪膠（僅侵襲實驗）

2. 細(xì)胞處理

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