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ELISA檢測技術(shù)服務(wù)

簡要描述:酶聯(lián)免疫吸附劑測定的基本原理是:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。

  • 更新時間:2026-03-20
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 訪  問  量:1855

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實(shí)驗(yàn)過程

(1)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:標(biāo)準(zhǔn)品按照說明書稀釋好五個梯度,各個梯度每孔加樣量都為50uL ;

(2)加樣:分別設(shè)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40uL,然后再加待測樣品10uL。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻;

(3)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30min;

(4)配液洗滌:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用;小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30sec后棄去,如此重復(fù)5次,拍干;

(5)加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50uL,孔除外;

(6)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30min ;

(7)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30sec后棄去,如此重復(fù)5次,拍干;

(8)顯色:每孔先加入顯色劑A50uL,再加入顯色劑B50uL,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15min;

(9)終止:每孔加終止液50uL,終止反應(yīng);

(10)測定:以空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15min以內(nèi)進(jìn)行。




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