
簡(jiǎn)要描述:itraq/TMT 是多肽體外標(biāo)記定量技術(shù),利用多種同位素試劑標(biāo)記蛋白多肽N末端或者賴(lài)氨酸側(cè)鏈基團(tuán),不同分子量的試劑對(duì)不同來(lái)源的樣品進(jìn)行標(biāo)記從而實(shí)現(xiàn)不同樣品間蛋白質(zhì)組的比較
產(chǎn)品分類(lèi)
Product Category詳細(xì)介紹
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1.樣品準(zhǔn)備:將待測(cè)樣品進(jìn)行定量計(jì)算出樣品蛋白濃度;
2.蛋白還原烷基化及酶解:每組樣品各取100ug按照iTRAQ試劑禽要求進(jìn)行處理,使用測(cè)序級(jí)****溶液酶解后,超濾管離心收集酶解肽段;
3.iTRAQ標(biāo)記:將iTRAQ試劑平衡到室溫,用150uL異丙.醇溶解,取酶解肽段加入iTRAQ試劑后室溫反應(yīng)2h,加入水終止反應(yīng),等量混合不同組樣品,真空冷凍干燥樣品;
4.LC-MS-MS分析:使用Thermo的Q-Exactive Orbitrao進(jìn)行串聯(lián)質(zhì)譜鑒定。
5,數(shù)據(jù)處理及生信分析
itraq/TMT 是多肽體外標(biāo)記定量技術(shù),利用多種同位素試劑標(biāo)記蛋白多肽N末端或者賴(lài)氨酸側(cè)鏈基團(tuán),不同分子量的試劑對(duì)不同來(lái)源的樣品進(jìn)行標(biāo)記從而實(shí)現(xiàn)不同樣品間蛋白質(zhì)組的比較
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