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1.樣品準備:將待測樣品進行定量計算出樣品蛋白濃度;
2.蛋白還原烷基化及酶解:每組樣品各取100ug按照iTRAQ試劑禽要求進行處理，使用測序級****溶液酶解后，超濾管離心收集酶解肽段;
3.iTRAQ標記:將iTRAQ試劑平衡到室溫，用150uL異丙.醇溶解，取酶解肽段加入iTRAQ試劑后室溫反應2h，加入水終止反應，等量混合不同組樣品，真空冷凍干燥樣品;
4.LC-MS-MS分析:使用Thermo的Q-Exactive Orbitrao進行串聯質譜鑒定。
5,數據處理及生信分析
itraq/TMT 是多肽體外標記定量技術，利用多種同位素試劑標記蛋白多肽N末端或者賴氨酸側鏈基團，不同分子量的試劑對不同來源的樣品進行標記從而實現不同樣品間蛋白質組的比較
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