堿性磷酸酶染色檢測技術(shù)

簡要描述：堿性磷酸酶染色檢測技術(shù)原理:
在一定條件下，使細(xì)胞中的酶作用于酶的底物，使其產(chǎn)物在原地進(jìn)行捕捉、沉淀轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物，細(xì)胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0-9.6)環(huán)境下使作用液中的底物(a-磷酸萘酚鈉)水解，產(chǎn)生出a萘酚，然后再與偶氨鹽偶聯(lián),生成不溶性的耐曬染料

更新時間：2026-03-21
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實(shí)驗(yàn)操作流程:

1、取材、固定、包埋、切片;

2、取已粘好烘干的切片兩塊，放入二甲苯(一)→二甲苯(二)(各3-4分鐘)的染缸中進(jìn)行脫蠟，再經(jīng)100%乙醇(一)

→100%<醇(二)→95%乙醇→90%乙醇 →70%醇→30%乙醇→水。每級各一分鐘，在移切片時，用鑷子夾住切片震蕩

并提起，放下反復(fù)幾次，在移入下一染缸邊緣前稍停留，讓溶液滴凈后，再入下一染缸，以免把上一染缸溶液過多帶入下

一染缸，而影響切片質(zhì)量;

3、將其中一塊切片以蠟筆作一標(biāo)記(用作對照組切片)，放入沸水中煮沸5分鐘;

4、將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘，作用液要事先預(yù)熱到37℃，水浴中進(jìn)行;

5、取出切片在蒸餾水中洗滌;

6、放入硝.酸.鈷溶液2-3分鐘;

7、蒸餾水沖洗干凈，否則切片易被污染，影響定位;

8、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;

9、蒸餾水沖洗干凈;

10、經(jīng)各級酒精脫水。即30%乙醇→70%乙醇→90%乙醇→950%乙醇→100%乙醇(二)→100%乙醇(一)，各級一分鐘。

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