一、核心原理：PEA 技術(shù)（一句話講透）

1. 抗體對 + DNA 標(biāo)簽：每個目標(biāo)蛋白對應(yīng)一對抗體，分別偶聯(lián)互補的單鏈 DNA（各帶蛋白特異條形碼）。

2. 雙識別 + 鄰位雜交：只有兩個抗體同時結(jié)合同一蛋白，兩條 DNA 才會靠近、雜交成雙鏈。

3. 延伸 + 擴增 + 定量：DNA 聚合酶延伸→PCR 擴增→qPCR/NGS 讀數(shù)；信號強度 = 蛋白濃度。

4. 關(guān)鍵優(yōu)勢：非特異性結(jié)合不會讓 DNA 靠近，幾乎無背景，特異性可達 99.7%。

二、Olink蛋白組技術(shù)特點

· 超微量：1–6 μL血清 / 血漿即可（比傳統(tǒng) ELISA 少 100 倍）。

· 超高靈敏：檢測下限 fg/mL 級，能抓到極低豐度的細胞因子、信號蛋白

· 超寬動態(tài)：10 個數(shù)量級，同時覆蓋高豐度（白蛋白）與低豐度（炎癥因子）

· 高通量：一次可測 96–384 樣本；蛋白數(shù)：Target（48/96）、Explore（384）、Reveal（~1000）。

· 高重現(xiàn)：CV<10%（板內(nèi)）、<20%（板間），適合大隊列（上萬例）。

· 樣本類型：血清、血漿、腦脊液、尿液、細胞上清、組織裂解液。

三、實驗流程（5 步出結(jié)果）

1. 樣本準(zhǔn)備：血清 / 血漿，1 μL 足夠。

2. PEA 反應(yīng)：加抗體對→孵育結(jié)合→DNA 雜交延伸。

3. PCR 擴增：生成帶條形碼的擴增子。

4. NGS/qPCR 檢測：測序或熒光定量，得到每個蛋白的讀數(shù)。

5. 數(shù)據(jù)分析：標(biāo)準(zhǔn)化→差異蛋白→通路富集→ biomarker 篩選。

四、Olink蛋白組應(yīng)用場景

1. 疾病 Biomarker 篩選：腫瘤早篩、自身免疫病、神經(jīng)退行性疾病（如阿爾茨海默病）、心血管??；AUC 可達 0.9+。

2. 大隊列流行病學(xué)：UK Biobank、中國慢性病隊列，上萬樣本的蛋白組掃描

3. 藥物研發(fā)：靶點驗證、藥效監(jiān)測、耐藥機制、pQTL 研究（蛋白數(shù)量性狀位點）

4. 多組學(xué)整合：Olink（蛋白）+ 基因組 + 轉(zhuǎn)錄組 + 代謝組，構(gòu)建疾病分子網(wǎng)絡(luò)。

5. 免疫與炎癥研究：細胞因子、趨化因子、免疫檢查點蛋白的原位 / 循環(huán)水平分析