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Edu染色服務：實驗步驟
1.將處于對數生的各實驗組細胞**消化后，培養基重懸成細胞懸液，并計數。
2.根據細胞生長快慢決定鋪板細胞密度，每組3-5重復，根據實驗設計決定鋪板數量。
3.統一鋪好后，待細胞沉淀下來后，在顯微鏡下觀察各實驗組的細胞密度，如果密度不均勻，則固定一組，微調其他組細胞的量再次鋪板(如:發現NC組細胞較多，降低細胞量再次鋪板)，放入細胞培養箱中培養。
4.鋪板后天與第四天，配制2X(20uM)的EDU工作液,將37℃預熱的2X的EDU工作液等體積加入96孔板中，是EDU終濃度變為1X，繼續孵育細胞2小時，EDU標記細胞完成后，去除培養液，并加入1mL固定液，室溫固定15分鐘，去除固定液，每孔用1mL洗滌液洗滌細胞3次，每次3-5分鐘，去除洗滌液，每孔用1mL通透液，室溫孵育10-15分鐘，去除通透液，每孔用1mL洗滌液洗滌細細胞1-2次，每次3-5分鐘。用內源性過氧化物酶封閉液室溫孵育20分鐘，用洗滌液洗滌3次，每次3-5分鐘。
5.EDU檢測:每孔加入50uL的Click反應液，室溫避光孵育30分鐘，吸出反應液，用洗滌液洗滌3次，每次3-5分鐘。
6.樣品的顯色 :在樣品上加Streptavidin-HRP工作液，室溫孵育30分鐘。 用洗滌液洗滌3次，每次2分鐘。加入0.1ml TMB顯色液，室溫孵育5-30分鐘或根據顯色情況孵育適當時間。直接在370nm或620-650nm測定吸光度。或加入25微升2M 終止反應，隨后在450nm測定吸光度。
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